Kappa/Lambda 的检测方法
Kappa/Lambda的检测通常使用实验室中的四种方法进行:原位杂交、免疫组织化学、流式细胞术和 PCR。
原位杂交
κ/λ链探针试剂是用于原位杂交法的专用试剂。为了更准确、更灵敏地找到κ:λ mRNA序列,该试剂旨在特异性地靶向该基因。该试剂能够与更广泛的材料配合使用,这非常有帮助。这使得它适用于分子病理学和临床诊断中的许多不同任务。
流式细胞术
流式细胞术是一个相对简单的过程,涉及在仪器分析之前制备和标记组织样本。作为该方法的一部分,单克隆荧光抗体用于标记细胞表面和细胞内部的特定蛋白质。使用这种方法可以非常特异性地找到目标蛋白质。此外,个体偏差不太可能影响结果的解读,这使得该方法更加灵敏。然而,需要注意的是,流式细胞术分析需要未经固定的新鲜组织样本。
免疫组织化学
免疫组织化学 (IHC)技术是一项成熟且设备要求极低的技术。它通常用于标记福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 样本。然而,IHC 的一个局限性是由于抗体的分泌特性,间充质免疫球蛋白 (Ig) 可能会干扰染色结果。这可能会影响染色数据的特异性。此外,IHC 还可能难以发现非大量存在的免疫球蛋白。尽管存在这些问题,IHC 仍然是一种有效的研究和诊断方法,因为它可以让我们了解蛋白质在组织样本中的生成位置和方式。
聚合酶链反应
使用聚合酶链式反应 (PCR)方法时,需要将样本送至专门的分子实验室进行检测。在此过程中,需要从样本中提取核酸。需要注意的是,PCR 研究并不能揭示任何有关组织或细胞的信息。其主要目的是发现并扩增特定的 DNA 或 RNA 模式。许多从事研究和分子生物学的人员使用 PCR 来寻找和了解遗传物质。
需要注意的是,准确计数应该是检测 Kappa/Lambda 的首要因素,
κ/λ原位杂交的优势
在分子病理学中,原位杂交是一种获得清晰准确标记数据的好方法。相比 免疫组织化学法更胜一筹,因为它能更清晰准确地观察细胞的各个部分。原位杂交法获得的染色清晰度使我们能够对样本进行更全面的分析,从而获得更准确的诊断。该方法适用于多种样本类型,使其成为各种诊断程序中的通用工具。
除此之外,原位杂交比流式细胞术和免疫组织化学等其他方法更灵敏、更特异。这种高灵敏度和特异性意味着原位杂交可以检测到细胞结构的细微变化,使其成为早期诊断疾病的有效工具。对于诊断浆细胞相关癌症和多发性骨髓瘤等疾病尤其重要,早期发现这些疾病对患者的康复至关重要。除了卓越的染色效果、高灵敏度和特异性外,原位杂交还可以计数并确定是否发生了轻链限制性增殖。这一特性对于正确诊断许多不同的疾病都至关重要。通过原位杂交,我们可以更好地了解疾病的传播方式,因为它可以清晰完整地显示细胞结构。这最终有助于制定更好的治疗方案。因此,原位杂交的优势远不止于诊断能力。它对于控制和治疗疾病也有很大帮助。
Celnovte 的 Kappa/Lambda 探针试剂盒 (ISH)
Celnovte公司成立于2010年,是一家专注于精准肿瘤检测工具及材料研发、生产和销售的高科技公司。公司专注于肿瘤早期筛查、精准诊断、药物合作伙伴以及治疗过程中的肿瘤追踪,致力于提供最优质的产品和服务。Celnovte已建立集研发、生产、销售和服务于一体的全产业链,致力于成为国内外领先的肿瘤病理诊断产品综合解决方案提供商。例如, CNT360全自动IHC&ISH染色仪, CNT 620全自动HE滴染封片机等高品质诊断仪器广受欢迎。公司已获得ISO9001、ISO13485和欧盟CE-ID认证,彰显了其对品质和创新的承诺。
Celnovte 推出Kappa/Lambda 探针试剂盒 (ISH) 。采用原位杂交技术,凭借 MicroStackerTM 微聚集二抗技术的突破,该试剂盒可获得清晰的染色,其性能远超免疫组化方法。它避免了免疫组化细胞间质中免疫球蛋白的非特异性染色造成的背景计数干扰。
淋巴瘤样本:
Kappa 探针套件和 Lambda 探针套件
应用场景
κ和λ是免疫球蛋白上的两种轻链。正常淋巴结中,表达不同轻链κ:λ的浆细胞比例约为2:1。κ或λ表达受限提示单克隆增殖和肿瘤形成。κ/λ原位杂交检测项目可以检测浆细胞中的κ/λ比例,以确认淋巴组织中是否存在κ或λ克隆性增殖(即该轻链表达受限)。
Kappa/Lambda原位杂交检测项目广泛应用于多发性骨髓瘤的诊断,也用于浆细胞相关疾病的诊断,如伴浆细胞分化的结外淋巴瘤、意义不明的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)、AL淀粉样变性、华氏巨球蛋白血症、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)/小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)、边缘区淋巴瘤(MZL)、伯基特淋巴瘤(BL),以及其他常见亚型的非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、滤泡中心淋巴瘤、前体B细胞白血病或急性淋巴细胞白血病。
Kappa/Lambda 探针试剂盒 (ISH)的原理
κ/λ原位杂交检测项目的探测过程基于植物来源的地高辛(DIG)标记探针的特异性杂交识别。通过利用包含二抗的信号级联,这种创新方法能够灵敏而精确地检测κ/λ细胞。该方法通过聚焦κ/λ mRNA序列,可以可靠、准确地检测多发性骨髓瘤和其他浆细胞相关疾病。HRP-DAB显色体系是一种便捷实用的分子病理学工具,可在光学显微镜下观察染色数据。凭借其实际的临床和病理学价值,该技术(包括广泛应用的EBER原位杂交技术)已成为诊断组织病理EBV感染的金标准。总而言之,κ/λ原位杂交检测项目提供了高度特异性和灵敏的结果,有助于淋巴瘤及相关疾病的识别和研究。
Kappa/Lambda 探针试剂盒 (ISH) 的特点
高灵敏度:针对 kappa/lambda mRNA 序列并利用创新的聚合物二抗显色系统。
高特异性:利用来自植物的DIG标记和优化的探针序列。
稳定性好:遵循SOP生产工艺,具有良好的热稳定性。
易于使用:提供稳定的验证方案,与免疫组织化学相比仅需增加两个步骤,使用方便。
易于解释:提供阳性对照图像,以准确定位染色。
更灵活:提供手动和自动试剂盒,兼容双重染色。
实验步骤
酶切-探针杂交-一抗孵育-二抗孵育-DAB显色染色
本方法与免疫组化方法相比,仅增加了酶消化和探针杂交步骤,操作更为便捷!